vispārinājums
Imunofunkcija ir laboratorijas tests, kas ļauj identificēt un tipizēt bioloģiskajā paraugā esošos gamma globulīnus .
Detalizēti, analīze ļauj pētīt pacienta asinīs vai urīnā imūnglobulīna klases (IgA, IgG, IgM, IgE vai IgD) un vieglā ķēdes kappa vai lambda veidu atbilstoši to specifiskajai elektroforētiskajai mobilitātei. . Pēc tam, lai identificētu, kura gamma-globulīns ir iesaistīts, imunofilācija ietver specifisku antigēnu inokulāciju fragmentam vai attiecīgajai antivielai ( anti-imūnglobulīna antisērijas ): aizdomās turēto izmaiņu klātbūtni apstiprina veidošanās. nogulsnes, kas redzamas ar neapbruņotu aci vai mikroskopu.
Šī informācija ir ļoti svarīga, jo īpaši, lai noteiktu plazmas šūnu patoloģiju (gammopātiju vai plazmas šūnu discrasias) diagnozi. Imunofunkcija ir ļoti noderīga multiplās mielomas, Waldenström makroglobulinēmijas un primārās amiloidozes (ko sauc arī par vieglo ķēžu amiloidozi) novērtēšanai un uzraudzībai.
ko
Imunofunkcija (vai imūnelektroforēze, kas arī saīsināta akronīms IFE ) ir metode, kas spēj noteikt, vai un kādā klasē imūnglobulīni (IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) vai vieglā ķēdes kappa vai lambda tips ir klāt. pacienta asins seruma un urīna pārpalikums vai defekts.
Kappa un lambda vieglās ķēdes raksturo monoklonālo komponentu, ti, antivielas ar tādu pašu ķīmisko struktūru.
Serums un urīna imunofekcija: kad tā ir norādīta?
Plazacelulārās displasijas vai gammopātijas ir neviendabīgas etioloģijas traucējumu grupa, ko raksturo:
- B šūnu klona nesamērīga izplatīšanās;
- Imunoglobulīna (vai tā polipeptīda apakšvienības) veida serumā un / vai urīnā klātbūtne ir strukturāli un elektroforētiski viendabīga ( monoklonāla ).
Parasti plazmas šūnu discrasias tiek diagnosticētas, izmantojot seruma un urīna proteīnu elektroforēzi, kam seko imūnfunkcijas serumā (IFE).
Vienlaikus var noteikt asins analīzi, lai izmērītu imūnglobulīnu kopējo koncentrāciju (IgG + IgM + IgA).
Lai uzzinātu vairāk: Imūnglobulīni - kas tie ir, kā tie tiek mērīti un atsauces vērtības »Imunfunkcijas: pamatprincips
Imunofekcija ir pārbaude, kas ietver divas fāzes (vispirms elektroforēze agarozes gēlā, pēc tam imunoprecipitācija ar specifiskiem antiserumiem ).
Pirmais imunofekcionēšanas solis ir tāds pats kā proteīnu (vai protidogrammas) ELEKTROORĒZE, tāpēc ir nepieciešams atcerēties kādu jēdzienu:
- Elektroforēze ir laboratorijas analīze, kas ļauj noteikt asins serumā vai citos bioloģiskos paraugos esošo olbaltumvielu daudzumu, un katrai frakcijai atklājas, vai ir kādas kvalitātes neatbilstības. Jo īpaši šis eksāmens ļauj atdalīt olbaltumvielas piecās grupās: albumīns, alfa 1 globulīns, alfa 2 globulīns, beta globulīns un gamma globulīns ; pēdējās tiek sīkāk izpētītas ar imunofikāciju.
- Elektroforēze ir atdalīšanas metode, kas balstās uz elektriski uzlādētu daļiņu atšķirīgu migrācijas ātrumu, izmantojot šķīdumu un inertu atbalsta vidi, elektriskās lauku ietekmē, ko ģenerē līdzstrāva. Praksē eksāmens izmanto elektrisko lādiņu un pacienta paraugā esošo proteīnu molekulmasu . Elektriskā lauka impulsā šie makromolekulas migrē un "grupa" pēc veida, reaģējot uz stresu raksturīgā veidā. Rezultāts ( elektroforētiskā izsekošana ) sastāv no dažādiem pīķiem un līknēm, kurām atbilst proteīna frakcijas. Parasti pirmais, augstāks un šaurāks, ir albumīna maksimums; sekot, mēs novērojam globulīna virsotnes, daudz zemākas par albumīnu. Ceļā veidojošo virsotņu amplitūdas un intensitātes pieaugums vai samazinājums norāda uz lielāku vai mazāku proteīnu klātbūtni katrā kategorijā; jo vairāk proteīnu atrodas joslā, jo augstāks ir attiecīgais maksimums. Gamma-globulīnu gadījumā, ja vēlaties uzzināt katras dažādās klases (IgA, IgM, IgG uc) daudzumu, būs nepieciešams izmantot vienu devu. Kopumā, jo vairāk joslas ir gamma globulīni, jo lielāks ir attiecīgais maksimums; augstums atbilst kopējam proteīnu daudzumam, kas pieder pie konkrētas kategorijas.
IMMUNOFISSATION nodrošina:
1) Agarozes gēla elektroforēze : pacienta paraugs (serums vai urīns) tiek nogulsnēts uz elektroforētiskās sloksnes, ti, atbalsts migrācijai (parasti agarozes gēls). Izmantojot elektrisko lauku, ko ģenerē līdzstrāva, tiek iegūta atdalīšana dažādās joslās. Praksē katrs maisījumā esošais gamma-globulīna veids (ti, pacienta paraugā) migrē, pamatojoties uz molekulmasu un elektrisko lādiņu. Ar gamma globulīnu atšķirīgā elektroforētiskā mobilitāte ļauj tos identificēt (katrs no tiem sakrīt ar konkrētu joslu elektroforēzes ceļā) un novērot jebkādas anomālijas.
2) Imunoprecipitācija ar specifiskiem antifēriem (fiksācija) : katram elektroforētiskajam sloksnim (anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-light kappa vai anti-ķēdei) tiek pievienoti specifiski antigēni specifiskai antivielai vai fragmentam. lambda vieglā ķēde). Ja klāt ir monoklonālais proteīns, antigēna mijiedarbība ar atbilstošo antivielu veidos šauru joslu (tas nozīmē, ka rezultāts ir pozitīvs) un nogulsnes, kas redzamas ar neapbruņotu aci vai mikroskopu. Visbeidzot, paraugs tiek apstrādāts (ti, mazgāts un nokrāsots), lai noņemtu proteīnus, kas nav izgulsnējušies, lai iegūtu želejas žāvēšanu un turpinātu rezultātu nolasīšanu.
Kāpēc tas darbojas
Kas ir imunofilācija?
Seruma imunofikācija ir eksāmens, kas paredzēts, lai diagnosticētu vai uzraudzītu slimības, ko raksturo gamma globulīnu izmaiņas, īpaši, ja tas attiecas uz monoklonālā komponenta ( monoklonālās gammopātijas ) ražošanu.
Lai uzzinātu vairāk: monoklonālās gammopātijas - kas un kas ir »Imunofunkcija ir noderīga, ja ir aizdomas par plazmas šūnu discrasiju, un tas ir būtisks MIELOMA (un saistīto patoloģiju) un MGUS (akronīms "nenoteiktas nozīmes monoklonālām gammopātijām") pētījumā.
Šis tests arī ļauj novērtēt Waldenström makroglobulinēmiju un vieglo ķēžu amiloidozi ( AL ).
Imunofekcija: kad tiek veikta izmeklēšana?
Imunofikācijas indikācija ir pēc klīniskiem vai laboratoriskiem pierādījumiem, kas rada aizdomas par monoklonālo antivielu vai imūnglobulīnu izmaiņām serumā vai urīnā.
Piemēram, šis eksāmens ļauj padziļināt seroprotektīvās vai urīna elektroforēzes rezultātus: ja elektroforētiskajā izsekošanā joslas, kas atbilst gamma-globulīniem, atšķiras no normāluma, imunofikācija identificē, kurš no šiem proteīniem ir mainīts pēc daudzuma. kvalitāti un kvalitāti.
Kopumā var noteikt seruma imunofikāciju:
- Gadījumā, ja citi laboratorijas testi nodrošina nenormālu rezultātu, proti, trūkst vai mazāks un lielāks daudzums plazmas olbaltumvielu attiecībā pret normu;
- Ja ir aizdomas par tādu slimību klātbūtni, ko raksturo monoklonālas sastāvdaļas, piemēram:
- Multiplā mieloma un tās varianti;
- Waldenström makroglobulinēmija;
- amiloidozes;
- Ja pacientam rodas simptomi un pazīmes, kas liecina par monoklonālas gammopātijas vai multiplās mielomas klātbūtni, piemēram:
- Kaulu sāpes;
- Anēmija;
- Viegli nogurums;
- Atkārtotas infekcijas;
- Neapšaubāmi lūzumi.
Vairāku mielomu gadījumā proteīnu elektroforēze un imunofikācija ir ļoti noderīga arī slimības progresa uzraudzībai (pēcpārbaude).
Immunofixācija: kur var veikt paraugus?
Bioloģiskie paraugi, kuriem var veikt imunofikāciju, galvenokārt ir:
- Serums (seruma imunofikācija);
- Urīns (urīna imunofikācija);
- Alkohols * (šķidruma imunofikācija).
* Piezīme : CSF vai cerebrospinālais šķidrums ir šķidrums, kas iekļūst un aizsargā smadzenes, muguras smadzenes, galvaskausa nervus un mugurkaula saknes.
Normālās vērtības
NEGATĪVA monoklonālo vai poliklonālo gamma globulīnu seruma un urīna imunofikācijas rezultāts tiek uzskatīts par normālu .
Gamma globulīni
Gamma globulīni veido 9-20% no kopējā plazmas olbaltumvielu daudzuma.
- Atsauces vērtība Gamma globulīns : 0, 9-1, 4 g / dl
Attiecībā uz imūnglobulīnu kopējo koncentrāciju ( IgG + IgM + IgA ) tiek uzskatīts, ka vērtības no 600 līdz 2300 mg / dl ir normālas.
- References vērtība Imunogobulīni serumā :
- IgA : 90-400 mg / dl
- IgG : 800-1800 mg / dl
- IgM : 60-280 mg / dl
- IgD : 0, 3-0, 4 mg / dl
- IgE : 20-440 mg / dl
Piezīme : eksāmena atskaites intervāls var nedaudz atšķirties atkarībā no vecuma, dzimuma un instrumenta, ko izmanto analīzes laboratorijā. Šā iemesla dēļ ir ieteicams iepazīties ar ziņojumiem tieši uzskaitītajiem diapazoniem. Jāatceras arī tas, ka analīžu rezultātus kopumā novērtē ģimenes ārsts, kurš zina pacienta slimības vēsturi.
Augstas vērtības - cēloņi
Gamma globulīnu pieaugums var būt:
- Ja poliklonāls, ja imūnglobulīnu ražošana ir neviendabīga, ti, visas gamma globulīnu sastāvdaļas, kas rodas vai rodas no dažādām plazmas šūnām, ietekmē pieaugums;
- Monoklonāls, ja gamma globulīni tiek ražoti vai iegūti no viena plazmas šūnu tipa (klona).
Poliklonālo gamma globulīnu pieaugums var būt saistīts ar:
- Hroniskas iekaisuma slimības;
- Reimatoīdais artrīts;
- Sistēmiskā sarkanā vilkēde;
- Hroniskas aknu slimības (piemēram, hepatīts un ciroze);
- Akūtas un hroniskas infekcijas;
- Jaunākās imunizācijas;
- Dažas audzēju slimības.
Augstas monoklonālo gamma globulīnu vērtības var norādīt uz:
- Daži audzēji un hroniski iekaisumi;
- Multiplā mieloma;
- limfomas;
- Waldenström makroglobulinēmija.
Gamma-globulīna lieko daudzumu sauc par hipergammaglobulinēmiju, bet deficīts ir pazīstams kā hipogammaglobulinēmija .
Zemas vērtības - cēloņi
Gamma globulīnu samazināšana var liecināt par dažādu imūnsistēmas slimību klātbūtni ģenētiskā bāzē, ieskaitot agammaglobulinēmiju vai sekundāru imūndeficītu (piemēram, AIDS, nieru mazspēju, akūtu sepsi un Kušinga sindromu).
Gama globulīna vērtību samazināšanās var būt atkarīga arī no citostatisko zāļu, imūnsupresantu un steroīdu lietošanas.
Kā tas tiek veikts
Seruma imunofikācija
Seruma imunofikācija ir saistīta ar vienkāršu asins paraugu ņemšanu no rokas. Serumu iegūst, centrifugējot bioloģisko paraugu; tas faktiski ļauj atdalīt frakciju, kas satur šūnas (korpusu daļu), no šķidruma - asins (plazmas). Asins serumā nav koagulācijas faktoru (fibrinogēns, VIII faktors, faktors V un protrombīns).
Urīnizvadīšana ar urīnu
Lai veiktu urīnizvadīšanu ar urīnu, ir nepieciešams savākt nelielu daudzumu urīna speciālā sterilā traukā. Pamatojoties uz ārsta un laboratorijas norādēm, paraugu var savākt bez precīzas laika ( nejaušības principa ) vai 24 stundu laikā .
Alkohola imunofonēšana
Analīzei ir nepieciešams veikt nelielu cerebrospinālā šķidruma daudzumu, ievadot adatu muguras dobumā ( jostas punkcija ).
sagatavošana
Immunofixācija: kā jūs sagatavoties eksāmenam?
- Pirms asins paraugu ņemšanas dažas laboratorijas var pieprasīt, lai jūs novērojat ātrumu, kas ir vismaz 10-12 stundas. Šajā laikā ir atļauts neliels ūdens daudzums.
- Imunofekciju var veikt ar urīnu, kas savākts noteiktā dienas laikā (nejaušā veidā) vai 24 stundu laikā, tāpēc pirms tam ir nepieciešams iegūt atbilstošus sterilus konteinerus.
- Attiecībā uz šķidruma imunofikāciju tā vietā nav nepieciešams īpašs preparāts.
Kas var mainīt eksāmena iznākumu?
Dažas zāles var ietekmēt imunofikācijas iznākumu, tāpēc ieteicams ziņot ārstam par visām notiekošajām zāļu terapijām.
Sešu mēnešu laikā pirms izmeklēšanas vakcīnu ievadīšana (imunizācija) un zāļu lietošana, piemēram, fenitoīns, prokainamīds, perorālie kontracepcijas līdzekļi, metadons un terapeitiskā gamma globulīns, var palielināt imūnglobulīnu koncentrāciju. Citas zāles, kas var mainīt testa rezultātus, ir kortikosteroīdi, neomicīns, acetilsalicilskābe un hlorpromazīns.
Rezultātu interpretācija
Imunofikācijas rezultāts tiek novērtēts kopā ar citu analīžu rezultātiem. Par konstatējuma interpretāciju ir atbildīgs ģimenes ārsts vai atsauces speciālists, kas var noteikt un salīdzināt noteiktās slimībās izmaiņas, kas ietekmē konkrētu gamma globulīnu (piemēram, joslu, kas sakrīt ar G imūnglobulīniem). Šis novērtējums apstiprina vai atbalsta diagnostisko hipotēzi: kopumā imunofikācija var atklāt normālu gamma globulīna profilu vai identificēt monoklonālo proteīnu vai poliklonālu modeli .
Pēc slimības noteikšanas var veikt imunofikāciju:
- Uzraudzīt slimību laika gaitā, pēc tam sekojiet tās gaitai (turpinājums);
- Pārbaudiet terapeitiskā protokola efektivitāti .
Imunofunkcijas plusi un mīnusi
Salīdzinot ar proteīnu elektroforēzi, imunofikācija:
- Tas ir ātrāks : imunizācijas rezultātus parasti iegūst trīs stundu laikā;
- Tas ir jutīgāks (lai gan nedaudz): imunofikācija var atklāt imūnglobulīnu, kas izslēgts no proteīnu elektroforēzes, jo īpaši zemās koncentrācijās (mazāk par 1 gramu litrā).
Turklāt: \ t
- To var daļēji automatizēt ;
- Tas ir viegli lasāms un interpretējams .
Tomēr imunofikācija ir dārgāka par proteīnu elektroforēzi un ļauj veikt tikai gamma globulīna analīzi .
Normāls rezultāts
Imunofikācijas gadījumā normāls ceļš ietver:
- Josla, kas sakrīt ar tumšāku imūnglobulīnu G ( IgG );
- Josla, kas atbilst vieglākajam imūnglobulīnam A ( IgA );
- Imunoglobulīna M ( IgM ) joslas trūkums;
- Kappa josla ir blīvāka nekā lambda (vieglā ķēde), ar attiecību 2: 1.
Normālos rezultātos joslas ir lielas un pakāpeniski un vienmērīgi samazinās krāsu blīvums pret imūnelektroforēzes sloksnes malām.
Poliklonālie gamma globulīni
Dažos gadījumos visas imunofikācijas joslas ir vienādi nosegtas līdzīgā mērā. Šis modelis atspoguļo poliklonālo imūnglobulīnu klātbūtni. Arī šajā gadījumā joslas ir plašas un pāreja uz imūnelektroforētiskās sloksnes malām ir pakāpeniska. IgM josla - parasti nav - ir plaša.
Monoklonālie gamma globīni
Ja imunofikācijas ceļā var identificēt šauru joslu ar asām malām, tas nozīmē, ka monoklonālo komponentu meklēšana ir pozitīva .
Monoklonālā imūnglobulīna identifikācija ir noderīga šādu nosacījumu diagnosticēšanai :
- Nenoteiktas nozīmes monoklonāla gammopātija (MGUS);
- Multiplā mieloma;
- Waldenstroma makroglobulinēmija;
- Nogulšņu.
Turklāt imunofikāciju var izmantot, lai kontrolētu terapiju plazmas šūnu diskazās (ti, multiplās mielomas un Waldenstrom makroglobulinēmijas gadījumā). Ja pēc ķīmijterapijas monoklonālās olbaltumvielas līmenis samazinās vai nav nosakāms, tas var liecināt par atbildes reakciju uz ārstēšanu . Turpretī monoklonāla proteīna, kas saglabājas, neskatoties uz ārstēšanu, ir ugunsizturīgas slimības pazīme .
Lūdzu, ņemiet vērā . Negatīvs imunofikācijas rezultāts ne vienmēr izslēdz plazmas šūnu discrasiju. Piemēram, ne-sekrēcijas multiplās mielomas vai oligosekro- rorijas rezultāti var sniegt negatīvus rezultātus gan urīnā, gan serumā. Tāpēc, ja diagnostiskā aizdomas par gammopātiju joprojām ir augstas, tiek norādīta Kappa / Lambda Libere gaismas ķēžu ( K / L attiecība ) attiecība .
Multiplās sklerozes imunofekcija un diagnostika
Smadzeņu šķidruma (šķidruma) imunofikācija tiek noteikta, ja ārsts aizdomas par multiplās sklerozes klātbūtni. Šajā gadījumā noteiktais ceļš ir raksturīgs, jo tas norāda uz tā saukto oligoklonālo joslu klātbūtni. Laboratorijas ziņojumā rezultāts ir pozitīvs . Jāņem vērā, ka serdi imūnfunkcionēšanā parasti netiek novērotas joslas, jo tās korelē ar intratekālo gamma globulīnu veidošanos .
Tomēr jāatzīmē, ka šis konstatējums ne vienmēr apstiprina diagnozi, jo ar oligoklonālajām joslām cerebrospinālajā šķidrumā var rasties citi apstākļi.
Citiem vārdiem sakot, oligoklonālo joslu identifikācija ar šķidruma imunofikāciju ir ļoti noderīga, lai atbalstītu multiplās sklerozes diagnozi, bet tas ir jāapstiprina ar citiem pētījumiem . Citi apstākļi, kas var nodrošināt šo rezultātu, ir centrālās nervu sistēmas iekaisumi, tai skaitā: ar HIV saistīta encefalīts, neirosifiliss, neirosarkoidoze, Laima meningoencefalīts, CNS ļaundabīgi audzēji, optiskā neiromielīts un transversāls mielīts.
